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聲明:上海賽抑生物科技有限公司為本公司(大連美侖生物)在上海地區(qū)的銷售分公司
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重組蛋白表達(dá)


哺乳動(dòng)物細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)服務(wù)

服務(wù)介紹:
重組蛋白表達(dá)技術(shù)可用于多種下游應(yīng)用,包括基因調(diào)控分析、蛋白結(jié)構(gòu)及功能分析、蛋白質(zhì)間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等多種蛋白表達(dá)系統(tǒng)的蛋白定制服務(wù)。
我們擁有達(dá)到cGMP標(biāo)準(zhǔn)的百級(jí)潔凈細(xì)胞房,擁有豐富的CHO及HEK293細(xì)胞表達(dá)經(jīng)驗(yàn)。
服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1、美侖生物的哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)團(tuán)隊(duì)擁有豐富的CHO及HEK293細(xì)胞表達(dá)經(jīng)驗(yàn)。

2、哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)以HEK293細(xì)胞和CHO細(xì)胞為表達(dá)宿主。

3、高成功率:我們會(huì)分析您的蛋白/抗體基因序列,結(jié)合自主研發(fā)高表達(dá)載體,實(shí)驗(yàn)成功率>95%。

4、我們專有的高密度(High Density, HD哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)技術(shù),以及優(yōu)化的表達(dá)方案和培養(yǎng)基,確保蛋白和抗體產(chǎn)量達(dá)到g級(jí)水平。

5、我公司哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)可實(shí)現(xiàn)復(fù)雜糖基化修飾,蛋白活性更高。

6、可實(shí)現(xiàn)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá),蛋白、抗體的快速小量制備。

7、具有完備的檢測(cè)平臺(tái),如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質(zhì)免疫印跡)等檢測(cè)平臺(tái),可對(duì)蛋白的濃度、純度、活性等多項(xiàng)性能進(jìn)行評(píng)估。

8、我們實(shí)行專人專項(xiàng)管理制度,即在整個(gè)項(xiàng)目期間,每個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)階段,都有相關(guān)人員與客戶進(jìn)行對(duì)接,始終保持與客戶間的溝通,保證項(xiàng)目進(jìn)展的透明化。

9、通過(guò)分步報(bào)價(jià)、按節(jié)點(diǎn)收費(fèi)的方式,全面降低客戶的風(fēng)險(xiǎn),極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

10、具有一定的靈活性,我們可根據(jù)客戶的不同需求,提供不同的實(shí)驗(yàn)方案,盡最大的努力滿足客戶的要求。

服務(wù)內(nèi)容:

主要流程

時(shí)間

內(nèi)容

交付內(nèi)容

基因合成及密碼子優(yōu)化

1-2周

客戶提供目的蛋白的序列信息或質(zhì)粒。


目標(biāo)基因亞克隆到哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體

1-2周

1.克隆至表達(dá)載體
(可選擇的表達(dá)載體,pcDNA3.1等真核表達(dá)載體)
2.質(zhì)粒測(cè)序
3.質(zhì)粒制備

測(cè)序報(bào)告(若客戶要求)

小量轉(zhuǎn)染并通過(guò)Western Blot檢測(cè)表達(dá)

2-3周

1.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293/CHO細(xì)胞
2.蛋白純化
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1. 0.1-0.5mg純化蛋白樣品
(如蛋白表達(dá)可行)
2. 質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)

目標(biāo)蛋白表達(dá)及純化

6-8周

目標(biāo)蛋白的再加工及詳細(xì)檢測(cè)

篩選穩(wěn)定高效的細(xì)胞株

周期將延長(zhǎng)



大量表達(dá)、純化及檢測(cè)(可選)

3-8周

100mg或更多蛋白
QC檢測(cè)

1.純化蛋白
2.質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)

服務(wù)報(bào)價(jià):15000元+(不含載體構(gòu)建)


畢赤酵母(P.pastoris)表達(dá)服務(wù)


服務(wù)介紹:
重組蛋白表達(dá)技術(shù)可用于多種下游應(yīng)用,包括基因調(diào)控分析、蛋白結(jié)構(gòu)及功能分析、蛋白質(zhì)間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等多種蛋白表達(dá)系統(tǒng)的蛋白定制服務(wù)。
畢赤酵母蛋白表達(dá)服務(wù),會(huì)從目的基因的特性,基因劑量,整合位點(diǎn),以及宿主選擇,轉(zhuǎn)化子表型和培養(yǎng)條件等多方面入手,再通過(guò)文獻(xiàn)查閱,密碼子分析,蛋白表達(dá)系統(tǒng)條件優(yōu)化等途徑生產(chǎn)出高純度蛋白。
服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1、美侖生物具有豐富的酵母蛋白表達(dá)經(jīng)驗(yàn),已成功表達(dá)出多種重組蛋白。

2、我公司具有篩選酵母表達(dá)高拷貝菌株的服務(wù),可以滿足客戶的多種特殊需求。

3、我公司利用酵母表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)過(guò)具有二硫鍵蛋白及糖基化蛋白,使蛋白具有類似天然的結(jié)構(gòu)和翻譯后修飾,保證了蛋白的活性。

4、酵母系統(tǒng)表達(dá)的過(guò)程中,對(duì)誘導(dǎo)時(shí)間及溫度的控制,對(duì)培養(yǎng)條件和菌株生長(zhǎng)周期的把握直接影響到重組蛋白表達(dá)的成敗,美侖生物的技術(shù)人員對(duì)整合流程把握和控制,提高表達(dá)的成功率及表達(dá)水平。高生產(chǎn)率:分泌信號(hào)序列保證了重組蛋白的大分泌量。

5、我公司可提供兩種表達(dá)體系:可選擇組成性表達(dá)或者誘導(dǎo)表達(dá)兩種體系。

6、我公司具有多種菌株和載體可供選擇:我們提供包括X33, GS115等多種菌株和多種載體。

7、可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn),高達(dá)200L的生物反應(yīng)器保證克級(jí)水平蛋白的生產(chǎn)。

8、我公司具有完備的檢測(cè)平臺(tái),如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質(zhì)免疫印跡)等檢測(cè)平臺(tái),可對(duì)蛋白的濃度、純度、活性等多項(xiàng)性能進(jìn)行評(píng)估。

9、我們實(shí)行專人專項(xiàng)管理制度,即在整個(gè)項(xiàng)目期間,每個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)階段,都有相關(guān)人員與客戶進(jìn)行對(duì)接,始終保持與客戶間的溝通,保證項(xiàng)目進(jìn)展的透明化。

10、通過(guò)分步報(bào)價(jià)、按節(jié)點(diǎn)收費(fèi)的方式,全面降低客戶的風(fēng)險(xiǎn),極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

服務(wù)內(nèi)容:

主要流程

內(nèi)容

時(shí)間

交付內(nèi)容

基因合成及密碼子優(yōu)化

客戶提供目的蛋白的序列信息或質(zhì)粒。

1-2周


目標(biāo)基因的亞克隆及
P.pastoris表達(dá)菌株電轉(zhuǎn)化

1.克隆至合適的表達(dá)載體
(可選擇的表達(dá)載體:pPICZα-A、pPIC9、pPIC9K、pPIC3.5K)
2.質(zhì)粒測(cè)序
3.質(zhì)粒制備

1-2周

測(cè)序報(bào)告(若客戶要求)

P.pastoris表達(dá)菌株篩選

酵母表達(dá)初篩

3-4周

1.1-3mg蛋白
2.表達(dá)評(píng)估報(bào)告

酵母表達(dá)菌株鑒定
(可選菌株:X33、GS115)

 

P.pastoris表達(dá)菌株表達(dá)優(yōu)化

酵母蛋白表達(dá)純化
(根據(jù)蛋白表達(dá)情況,選擇合適的純化方式)

3-4周

大量表達(dá)及純化(可選)

更多蛋白
QC檢測(cè)

3-8周

1.純化蛋白
2.質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)

服務(wù)報(bào)價(jià)10000元+(不含載體構(gòu)建)


桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)服務(wù)

服務(wù)介紹:
重組蛋白表達(dá)技術(shù)可用于多種下游應(yīng)用,包括基因調(diào)控分析、蛋白結(jié)構(gòu)及功能分析、蛋白質(zhì)間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等多種蛋白表達(dá)系統(tǒng)的蛋白定制服務(wù)。
桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)(baculovirus expression vector system,BEVS)是當(dāng)今基因工程四大表達(dá)系統(tǒng)之一。BEVS屬于真核表達(dá)系統(tǒng),通過(guò)BEVS得到的重組病毒易于篩選、具有翻譯后修飾功能、表達(dá)外源基因的效率較高。BEVS還可以同時(shí)表達(dá)多個(gè)外源基因,在分泌蛋白生物活性的同時(shí)增加產(chǎn)量。因此,BEVS在科研和工業(yè)生產(chǎn)中通常應(yīng)用于大規(guī)模重組蛋白的制備。
服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1、高效性:我們的系統(tǒng)基于最新的技術(shù),保證胞內(nèi)或者分泌的重組蛋白的高水平表達(dá)。具有易于表達(dá)異源多聚體蛋白、安全性高等特點(diǎn),重組表達(dá)的蛋白產(chǎn)品具有正確的翻譯后修飾和生物學(xué)活性,如二硫鍵的形成、磷酸化、糖基化等。

2、我公司昆蟲表達(dá)系統(tǒng)可表達(dá)分子量較大的外源性基因(最高可達(dá)200kD),適合大分子蛋白的表達(dá);最高表達(dá)量可達(dá)昆蟲細(xì)胞蛋白總量的50%。

3、多種昆蟲動(dòng)物細(xì)胞Sf9,Sf21及其它昆蟲細(xì)胞系可供選擇。

4、昆蟲表達(dá)系統(tǒng)比哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)操作簡(jiǎn)單。

5、一站式解決方案,從基因合成到蛋白表達(dá)純化。

6、重組蛋白生物活性高,表達(dá)水平高,能同時(shí)表達(dá)多個(gè)基因。

7、可添加信號(hào)肽,促進(jìn)蛋白更易純化。

8、相對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)成本低。

9、具有完備的檢測(cè)平臺(tái),如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質(zhì)免疫印跡)等檢測(cè)平臺(tái),可對(duì)蛋白的濃度、純度、活性等多項(xiàng)性能進(jìn)行評(píng)估。

10、我們實(shí)行專人專項(xiàng)管理制度,即在整個(gè)項(xiàng)目期間,每個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)階段,都有相關(guān)人員與客戶進(jìn)行對(duì)接,始終保持與客戶間的溝通,保證項(xiàng)目進(jìn)展的透明化。

11、通過(guò)分步報(bào)價(jià)、按節(jié)點(diǎn)收費(fèi)的方式,全面降低客戶的風(fēng)險(xiǎn),極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

12、具有一定的靈活性,我們可根據(jù)客戶的不同需求,提供不同的實(shí)驗(yàn)方案,盡最大的努力滿足客戶的要求。

服務(wù)內(nèi)容:

主要流程

時(shí)間

內(nèi)容

交付內(nèi)容

基因合成及密碼子優(yōu)化

1-2周

客戶提供目的蛋白的序列信息或質(zhì)粒。


目標(biāo)基因亞克隆到pFastBac供體質(zhì)粒

1-2周

1.克隆至表達(dá)載體
2.質(zhì)粒測(cè)序
3.質(zhì)粒制備

測(cè)序報(bào)告(若客戶要求)

制備重組桿狀病毒Bacmid DNA

2-3周

1.病毒包裝
2.病毒擴(kuò)增


目的蛋白的表達(dá)純化

2-4周

1.病毒侵染細(xì)胞
2.小量表達(dá)、純化及條件優(yōu)化
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1. 0.1-0.5mg純化蛋白樣品
(如蛋白表達(dá)可行)
2. 質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)

大量表達(dá)、純化及檢測(cè)
(可選)

3-8周

100mg或更多蛋白
QC檢測(cè)

1.純化蛋白
2.質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)

服務(wù)報(bào)價(jià):20000元+(不含載體構(gòu)建)

大腸桿菌(E.coli)表達(dá)系統(tǒng)服務(wù)

服務(wù)介紹:
重組蛋白表達(dá)技術(shù)可用于多種下游應(yīng)用,包括基因調(diào)控分析、蛋白結(jié)構(gòu)及功能分析、蛋白質(zhì)間相互作用分析等。我們可提供基于原核、酵母、昆蟲桿狀病毒、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等多種蛋白表達(dá)系統(tǒng)的蛋白定制服務(wù)。
原核表達(dá)系統(tǒng)是通過(guò)原核生物來(lái)獲得外源蛋白的體系。原核表達(dá)是目前常用的重組蛋白表達(dá)方式之一,操作相對(duì)簡(jiǎn)便,要求較低。相對(duì)哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)更加經(jīng)濟(jì)節(jié)約。
服務(wù)優(yōu)勢(shì):

1、美侖生物擁有豐富的大腸桿菌可溶性蛋白表達(dá)、純化及蛋白變復(fù)性經(jīng)驗(yàn)。

2、我公司擁有多種E. coli細(xì)胞株和表達(dá)載體,滿足特定蛋白質(zhì)胞內(nèi)表達(dá)及周質(zhì)空間分泌表達(dá)需求。也可利用SUMO、GST、Trx及NusA等促融標(biāo)簽解決蛋白自身疏水性造成不可溶表達(dá)問題。提供從密碼子優(yōu)化到重組蛋白表達(dá)、純化的一站式服務(wù)以及標(biāo)簽去除、內(nèi)毒素去除等附加服務(wù),以滿足不同的定制需求。

3、針對(duì)于有些外源基因在大腸桿菌中重組表達(dá)會(huì)形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白質(zhì)的包涵體的情況,我們會(huì)進(jìn)行表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)化,盡量降低形成包涵體的幾率。

4、我們會(huì)通過(guò)評(píng)估確定復(fù)性條件,進(jìn)行溫和的包涵體變復(fù)性。

5、我們提供的復(fù)性蛋白純度在95%以上。對(duì)于客戶要求切除標(biāo)簽的情況,我們可以做到切標(biāo)簽不留殘基。

6、我們具有特色的低溫誘導(dǎo)表達(dá)體系,提高了蛋白可溶表達(dá)幾率,增加了表達(dá)成功和蛋白產(chǎn)物的活性概率??蔀榭蛻籼峁﹥?yōu)質(zhì)的原核蛋白表達(dá)服務(wù)。

7、可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。

8、具有完備的檢測(cè)平臺(tái),如Elisa(酶聯(lián)免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝膠電泳、Western Blot(蛋白質(zhì)免疫印跡)等檢測(cè)平臺(tái),可對(duì)蛋白的濃度、純度、活性等多項(xiàng)性能進(jìn)行評(píng)估。

9、我們實(shí)行專人專項(xiàng)管理制度,即在整個(gè)項(xiàng)目期間,每個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)階段,都有相關(guān)人員與客戶進(jìn)行對(duì)接,始終保持與客戶間的溝通,保證項(xiàng)目進(jìn)展的透明化。

10、通過(guò)分步報(bào)價(jià)、按節(jié)點(diǎn)收費(fèi)的方式,全面降低客戶的風(fēng)險(xiǎn),極大程度上節(jié)約了客戶的成本。

服務(wù)內(nèi)容:

主要流程

時(shí)間

內(nèi)容

交付內(nèi)容

基因合成及密碼子優(yōu)化

1-2周

客戶提供目的蛋白的序列信息或質(zhì)粒。


載體構(gòu)建

1-2周

1.克隆至合適的表達(dá)載體(可選擇的表達(dá)載體以pET和pGEX系列為主)
2.質(zhì)粒測(cè)序
3.質(zhì)粒制備

測(cè)序報(bào)告(若客戶要求)

表達(dá)鑒定及可溶性分析

1-2周

1.10mL培養(yǎng)
2.3個(gè)表達(dá)條件嘗試
3.表達(dá)菌株的選擇
4.蛋白表達(dá)評(píng)估 (SDS-PAGE)

表達(dá)評(píng)估報(bào)告

放大表達(dá)和1-2步純化

1-2周

1.蛋白純化 (可溶表達(dá))
2.蛋白變性復(fù)性純化 (包涵體)
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1.0.5-1mg純化蛋白樣品
(如蛋白表達(dá)可行)
2.質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)

大量表達(dá)及純化(可選)

2-8周

1.100mg或更多蛋白
2.QC檢測(cè)

1.純化蛋白
2.質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告 (CoA)

附加項(xiàng)訂購(gòu)信息

時(shí)間

內(nèi)容

交付內(nèi)容

蛋白去內(nèi)毒素

1-2周

去除蛋白內(nèi)毒素

質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告(CoA)

服務(wù)報(bào)價(jià):8000元+(不含載體構(gòu)建)